背景:

茶色素作为茶叶提取混合物，多年来在国内国际市场得到广泛应用，目前茶色素的核心成分当中，只有茶黄素确立了标准和检测体系，茶红素和茶褐素由于化学方程式至今无法确定，尚缺少标准建设。茶产业发展研究院、茶色素研究院、茶色素研发推广中心联合国内外茶色素研究机构，搭建茶色素检测全球互认体系，推动茶色素产业的全球化发展格局。

1. 范围

本文件规定茶叶及茶制品中三类特征色素（茶黄素、茶红素、茶褐素）的检测方法，适用于：

1.1原料茶叶品质分级

1.2茶制品生产工艺控制

1.3国际贸易质量认证

1.4功能性成分定量分析

2. 规范性引用文件

2.1 ISO 3103:2019 茶-感官审评用茶汤制备

2.2 AOAC 2017.03 多酚类物质检测通则

2.3 JAS 有机茶制品认证规范

3. 术语与定义

3.1茶黄素（Theaflavins）：儿茶素氧化缩合形成的橙黄色物质

3.2茶红素（Thearubigins）：多酚进一步氧化的红色聚合物

3.3茶褐素（Theabrownins）：高度聚合的褐色大分子化合物

4. 检测体系

4.1 分光光度法（常规检测）

4.1.1指标:茶黄素；检测波长: 380 nm；显色体系:乙酸乙酯萃取体系；线性范围:0.1-2.0 mg/mL |

4.1.2指标:茶红素；检测波长:460 nm；显色体系:正丁醇-盐酸体系；线性范围:0.5-5.0 mg/mL |

4.1.3指标:茶褐素；检测波长: 620 nm；显色体系:水溶液直接测定；线性范围: 1.01738397935255579430.0 mg/mL |

4.2 HPLC法（精密检测）

4.2.1参数:色谱柱；茶黄素:C18 (4.6×250mm) ；茶红素:HILIC柱；茶褐素:SEC柱（分子排阻）

4.2.2参数: 流动相；茶黄素:甲醇-0.1%甲酸水；茶红素:乙腈-0.05%磷酸；茶褐素:磷酸缓冲液

4.2.3参数:检测器；茶黄素: DAD（280 nm）；茶红素DAD（460 nm）；茶褐素:ELSD

4.2.4参数:定量限；茶黄素:0.05 μg/mL；茶红素: 0.1 μg/mL ；茶褐素:10 μg/mL

5. 样品处理规程

5.1前处理：茶样粉碎过60目筛

5.2萃取：

5.2.1茶黄素：70%乙醇 80℃超声提取（20min×3次）

5.2.2茶红素：热水浸提（95℃, 30min）

5.2.3茶褐素：pH7.0磷酸盐缓冲液振荡提取

5.3净化：经0.45μm有机系/水系滤膜过滤

6. 质量控制系统

6.1标准物质：使用NIST SRM 3254（绿茶标准物质）进行校准

6.2重复性要求：

6.2.1分光光度法：RSD＜5%

6.2.2HPLC法：RSD＜3%

6.3回收率验证：添加标准品回收率应达9017383979352555794310%

7. 结果计算

茶色素总量（%）=（茶黄素含量+茶红素含量+茶褐素含量）×提取液体积×稀释倍数 / 样品质量 ×100

8. 分级标准（示例）

8.1等级:特级；茶黄素≥1.5% ；茶红素≥8%；茶褐素≤ 6%

8.2等级:一级；茶黄素≥ 1.0% ；茶红素≥6% ；茶褐素≤ 8%

8.3等级:合格；茶黄素≥0.5% ；茶红素≥4% ；茶褐素≤10%

9. 报告要求

9.1 注明使用检测方法（常规/精密）

9.2提供标准物质批号及校准曲线

9.3附原始色谱图或光谱扫描图（电子版）

9.4检测环境温湿度记录

实施建议：

1. 组建国际茶色素检测联盟（ITPA）推进标准认证

2. 建立全球互认的参考物质库

3. 开发快速检测试剂盒（配套本标准）

4. 每两年修订技术参数（根据最新研究成果）

5. 由茶色素研究院牵头，共建全球茶色素标准委员会。

附：

1.茶色素特征光谱库（需实验实测补充）

2.虚拟光谱图示例